양막을 이용한 각막 간질세포의 배양과 중배엽 줄기세포의 분화유도

초록

목적: 생체 외 배양 조건에 따른 토끼 각막 간질세포의 특징을 분석하고, 각막 간질세포 조건배지를 이용한 중배엽 줄기세포의 간질세 포로의 분화여부를 확인하고자 하였다. 대상과 방법: 토끼 각막 간질세포를 양막의 간질층과 배양접시에 각각 접종하여 증식시킨 후 형태학적 변화를 관찰하였다. 토끼 중배엽 줄기세포를 양막에 접종하여 α-MEM과 각막 간질세포 조건배지를 혼합하여 배양하였으며, 각막 간질세포 표지유전자(keratocan, lumican, aldehyde dehydrogenase family, member A1 (ALDH1A1))의 발현양상을 분석하였다. 결과: 양막에 배양된 간질세포는 수지상이었고 느린 증식속도를 나타낸 반면, 접시에서는 빨리 증식하였으며 방사상이었다. 양막에 배양한 경우 표지유전자 모두 발현이 잘 유지된 반면 접시에서는 점차 감소하였다. 또한, 중배엽 줄기세포를 양막에서 각막 간질세포 조건배지로 배양하면 keratocan과 ALDH1A1의 발현이 유도되었다. 결론: 각막 간질세포를 양막을 매개로 배양하면 그 형태와 표지유전자의 발현이 유지되었으며, 조건배지와 양막을 이용해 중배엽 줄기 세포의 각막 간질세포로의 분화 가능성을 확인하였다.

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